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之后，张四维和曾省吾等发生了冲突，御史江东之上疏，弹劾冯保家的门客徐爵，这也仅仅是对于张居正余威势力进行打击的试探而已。在这之后，御史李植也直接上疏，弹劾冯保，书写出冯保的十二大罪状，同时，司礼太监张诚、张鲸也添油加醋、煽风点火，在明神宗面前对冯保进行攻击。他们空口无凭地说冯保家家财万贯，资产丰厚，甚至胜过了帝王之家。神宗听后震怒，直接下令逮捕冯保，之后，将冯保发配至南京。与此同时，梁梦龙、曾省吾、王篆等冯保的旧部也都被勒令停职。紧接着，明神宗查抄了冯保的家产，清点出黄金白银各万余两，珠宝珍品无数。这让明神宗初次尝到了查抄的美妙滋味。至此开始，他便一发不可收拾，对张居正的余党开始各种清理和查抄。
在冯保临走的时候，慈圣皇太后还不太清楚到底发生了什么事情，于是她问神宗为什么要这样对待冯保。而神宗说：“没有什么，只是老奴才受到了张居正的蛊惑。不过没关系，在不久之后我就会自行召回他的。”
慈圣皇太后还以为神宗仍然是以前那个听话的孩子，但是实际上他已经二十几岁，知道如何应付母亲的审问和要求了。对于神宗来说，张居正、冯保、慈圣皇太后，仅仅是一连串的控制噩梦，当一个噩梦被消除了之后，另外的梦境残影也将接连被消除，而神宗也终于决定要自己掌控自己的命运。于是，在张居正去世不久后，就连慈圣皇太后也遭到了神宗的冷落。